在众多的生物实验室,分子生物学检测方法如pcr因其高灵敏度、快速、操作方便等优势已经被广泛应用,不过正是由于它灵敏度极高,极微量的污染源都有可能导致检测结果的假阳性,所以对环境污染的控制也极为严格。如何解决pcr实验室检测被污染的问题呢?下面广州华创工程pcr实验室装修公司的小编给大家详细的分析分析一下。
pcr反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生。面对众多的污染源,比如样本交叉污染、试剂仪器交叉污染、克隆质粒污染、pcr扩增产物污染。
还有极容易忽视的气溶胶污染,气溶胶是由固体或液体小质点分散并悬浮在气体介质中形成的胶体分散体系,在空气与液体面摩擦时,比如在操作时比较剧烈地摇动反应管,开盖时、吸样时及污染进样枪的反复吸样都可形成气溶胶而污染。这样的污染来的悄无声息,防不胜防。
解决pcr实验室被污染的方法
1、酒精擦拭:核酸沉淀,擦拭后确保污染表面污染得到一定程度的缓解(简单、方便、低成本)。
2.修饰:标记遗传物质,防止聚合酶与核酸的结合,抑制dna扩散(效果比较好)。
3.酶解:酶可将长链核酸分子降解成小片段(速度快,效果相对较好)。
4.高压变性:高压可将核酸降解为20-30bp小片段(彻底,成本低)。
5.紫外照射:pcr二聚体在产品中形成,延伸终止(方便、范围广、成本低)。
在有实验室的地方,实验室污染是不可避免的。实验室污染不仅会影响实验和科研的质量和效果,还会损害实验室工作人员的健康。pcr实验室应始终注意污染监测,考虑是否有污染,以采取措施防止和消除污染。
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